Klabukov, Ilya (2018) Многослойная тканеинженерная конструкция на основе биодеградируемых и биосовместимых материалов для восстановления поврежденных желчных путей. [Multicouche la conception de l'ingénierie tissulaire à base de matériaux biodégradables et biocompatibles pour la réparation du tractus biliaire blessé.] PhD thesis. HAL CCSD. [Unpublished]
Full text not available from this repository.
Document available online at: https://hal.archives-ouvertes.fr/tel-02049597
Summary
Цель: Создать и оценить биологическую и физиологическую совместимость многослойной тканеинженерной конструкции желчного протока, основу которой составляет микроволокнистый каркас из биодеградируемого и биосовместимого полимера, с двухслойной адгезией на нем клеток, длительная дренажная функция которого обеспечивается его предварительной витализацией. Материал и методы: В работе использованы методы хирургического эксперимента, конфокальной и электронной микроскопии, иммуно-ферментного анализа, измерения клеточного индекса в реальном времени, гистологии, иммуногистохимии, а также комплекс методов клеточной биологии в условиях ЦКП «Регенеративная медицина». Образцы биосовместимых каркасов получены методом электроспиннинга из волокнистого поликапролактона, сополимеров молочной и гликолиевой кислот, диацетата целлюлозы и других полимеров. Методом эмульсионного электроформования были получены биосовместимые образцы микроволокнистого поликапролактона, содержащие биологически активные соединения GFP, EGF и генотерапевтический препарат «Неоваскулген» (плазмида VEGF165). Оценка высвобождения биологически активных соединений, их биологической активности in vitro и влияние на окружающие ткани проведены в лабораторных условиях, на клеточных культурах in vitro, а также при имплантации in vivo. Использовались 4 типа клеточных культур и 2 вида лабораторных животных. Проведены морфологические исследования эксплантированных образцов методами гистологии и иммуногистохимии. Для заселения биосовместимых микроволокнистых образцов использовались методы статичного, динамического и тканевого культивирования. Работа с лабораторными животными выполнялась в Центральном виварии Первого МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России. Результаты и их новизна: Впервые разработан и обоснован дизайн тканеинженерной конструкции желчного протока из модифицированных и комбинированных материалов, которая предназначена для предотвращения возникновения не только ранних, но и поздних послеоперационных осложнений при восстановительных операциях на желчных путях. Определено, что физиологическая совместимость многослойных каркасов с физико-механическими свойствами, соответствующими свойствам нативных тканей, может быть достигнута при использовании метода эмульсионного электроспиннинга. Установлено, что витализация каркаса тканеинженерной конструкции препаратом «Неоваскулген» и эпидермальным фактором роста обеспечивает пролонгированный и контролируемый выход веществ по мере резорбции каркаса для обеспечения ангиогенной функционализации трансплантата. Степень и эффективность внедрения: Результаты диссертационной работы внедрены в учебный процесс на кафедре госпитальной хирургии лечебного факультета и в практическую деятельность Отдела передовых клеточных технологий Института регенеративной медицины Первого МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России. Применение: Разработанные способы получения биологически и физиологически совместимых тканеинженерных конструкций могут быть использованы в качестве элементов биоконструктора для получения моделей полых эпителиальных органов.
Summary translation
La conception des organes transgéniques est encore compliquée en raison du manque de compréhension des mécanismes biologiques qui stimulent les conditions physiologiquement pertinentes et induisent des milieux cellulaires pertinents. La revue systématique a identifié les exigences qualitatives et quantitatives relatives à la construction du canal biliaire par ingénierie tissulaire. Une approche spécifique aux tissus a été utilisée pour sélectionner les matériaux, les produits biologiques et les cellules en vue de la création d'un construit physiologiquement pertinent pour la réparation du tractus biliaire lésé. Des échantillons d'échafaudages fibreux de PCL, PGLA, PLCL et de diacétate de cellulose ont été créés par un procédé d'électrofilage et évalués avec un test MTT pour l'évaluation de la cytotoxicité. Les propriétés mécaniques de l'échantillon de la voie biliaire humaine et des échafaudages fibreux ont été évaluées pour le module de Young et le pourcentage d'allongement. Les propriétés mécaniques des matériaux fibreux ont été évaluées in vitro au cours de la dégradation et de l'érosion dans divers milieux. Des échafaudages PCL fibreux ont été formés par électrofilage en émulsion avec incorporation des biomolécules suivantes: médicament de thérapie génique Neovasculgen (plasmide VEGF165), EGF et GFP. La microscopie par fluorescence des fibres a confirmé la modification du volume par des biomolécules. Le ELISA test a confirmé la sortie prolongée de biomolécules d'EGF du PCL-échafaudage in vitro. L'implantation d'échafaudages PCL modifiés par Neovasculgen chez le rat a montré une augmentation de la densité vasculaire dans la zone d'implantation. Un modèle porcin expérimental de lésion des voies biliaires iatrogènes a été créé et l'implantation consécutive d'un échafaudage PCL fibreux tubulaire dans les voies biliaires porcines a montré une biocompatibilité physiologique physiologique spécifique au tissu des PCL fibreuses. Des échafaudages fibreux à trois couches de PCL et PLCL / PLGA ont été obtenus par électrofilage et soumis à des tests de propriétés mécaniques. L'échantillon d'échafaudage à trois couches de PCL et PLGA fibreux modifiés avec incorporation d'EGF et de Neovasculgen était ensemencé sur deux faces avec des cellules souches mésenchymateuses dérivées de la moelle osseuse et des cellules épithéliales des canaux biliaires afin d'obtenir la construction modifiée par le tissu.
| EPrint Type: | Thesis |
|---|---|
| Thesis Type: | PhD |
| Keywords: | angiogenic vitalization (en), bioengineered bile duct (en), intertissue connection (en), regenerative medicine (en), tissue engineering (en), electrospinning (en), vitalisation angiogénique (fr), voies biliaires bioengineered (fr), connexion intertissue (fr), médecine régénérative (fr), création de tissus (fr), électrofilage (fr) |
| Subjects: | "Organics" in general |
| Research affiliation: | France > INRAe - Institut national de recherche pour l’agriculture, l’alimentation et l’environnement |
| Related Links: | https://hal.archives-ouvertes.fr/tel-02049597/document |
| Project ID: | HAL-INRAe |
| Deposited By: | PENVERN, Servane |
| ID Code: | 41316 |
| Deposited On: | 12 Aug 2021 10:37 |
| Last Modified: | 12 Aug 2021 10:37 |
| Document Language: | Russian/Russkiy |
| Status: | Unpublished |
Repository Staff Only: item control page
